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cas:41994-02-9,生物素-酪氨,Biotinyl Tyramide的特點

2025-12-06 [57]

生物素-酪氨(Biotinyl Tyramide)是一種結合了生物素(Biotin)與酪氨(Tyramide)的生物標記試劑,在生物化學和生物醫學研究中具有廣泛應用,尤其在信號放大技術中表現突出。

一、結構特性

生物素-酪氨由生物素與酪氨通過共價鍵連接而成,分子式為C??H??N?O?S,分子量為363.48。其結構包含兩部分:

  • 生物素部分:具有特殊的五元環與六元環相連結構,賦予其與鏈霉親和素(Streptavidin)或親和素(Avidin)較高的親和力(結合常數Kd≈10?1? M),形成穩定復合物。

  • 酪氨部分:作為過氧化物酶(如辣根過氧化物酶,HRP)的底物,含有活性酚羥基,可在HRP催化下生成高活性自由基,與周圍生物分子共價結合。

結構式:
image.png

二、作用機制

生物素-酪氨的核心功能是通過酪胺信號放大(Tyramide Signal Amplification, TSA)技術實現信號增強,其過程如下:

  1. HRP催化反應:HRP標記的抗體或探針識別靶點后,在過氧化氫(H?O?)存在下,催化生物素-酪氨的酪氨部分生成高活性自由基。

  2. 共價沉積:自由基與靶點附近的蛋白質或核酸中的酪氨酸殘基共價結合,將生物素標記固定于靶區域。

  3. 二級信號放大:通過鏈霉親和素偶聯物(如熒光染料、酶或金屬粒子)結合生物素,進一步放大信號,提高檢測靈敏度。

三、應用領域

生物素-酪氨因其高靈敏度和特異性,廣泛應用于以下領域:

  1. 免疫組織化學(IHC)

    • 檢測低表達抗原,減少非特異性背景信號。

    • 克服固定程序不理想或靶蛋白表達水平低導致的弱免疫標記問題。

  2. 熒光原位雜交(FISH)與原位PCR

    • 增強核酸探針的信號,便于觀察核酸分布和表達情況。

  3. 蛋白質組學研究

    • 標記特定蛋白質或肽段,研究蛋白質相互作用、定位及翻譯后修飾。

  4. 細胞生物學研究

    • 標記細胞表面分子,追蹤其動態變化及與其他分子的相互作用。

  5. 藥物研發

    • 作為藥物載體,通過靶向識別腫瘤細胞表面受體,實現精準藥物遞送。

  6. 多重染色與電鏡免疫標記

    • 在多輪免疫染色中作為穩定標記形式,或配合金標鏈霉親和素用于高分辨率定位。

四、儲存條件

為保持生物素-酪氨的穩定性,需遵循以下儲存條件:

  • 溫度:建議避光保存于-20℃以下,部分產品可短期儲存于-15℃。

  • 避光防潮:防止光照和潮濕環境導致分解。

  • 溶劑:通常以二甲基亞砜(DMSO)為溶劑,需密封保存以避免揮發。

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