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851113-28-5,Biotin-XX Tyramide Reagent ,生物素-XX 酪酰胺試劑的性質

2025-12-07 [38]

生物素-XX 酪酰胺試劑(Biotin-XX Tyramide Reagent,CAS號:851113-28-5)是一種用于生物分子標記和檢測的生化試劑。

一、基本性質

  1. 分子結構:由酚基、酪酰胺核心和長鏈親水生物素(Biotin-XX)組成。長鏈結構(XX)提供柔性空間,使生物素遠離反應位點,降低空間位阻對鏈霉親和素結合的影響。

  2. 分子式與分子量:分子式為C??H??N?O?S,分子量約為589.8。

  3. 物理形態:淡黃色至淡棕色固體或粉末。

  4. 溶解性:易溶于有機溶劑(如DMSO、DMF)及部分水溶性緩沖液,溶解度≥59 mg/mL(DMSO)。

  5. 穩定性:干燥狀態下穩定,需低溫(-20℃)避光保存;水溶液或含過氧化氫體系中酚基易氧化,需新鮮配制或避光操作。

  6. pH適應性:常用緩沖液范圍為pH 7–9,生物實驗條件下穩定,不影響靶分子結構。

結構式:
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二、核心功能

  1. 信號放大:在過氧化物酶(如HRP)催化下,酚基氧化生成酚氧自由基,與靶分子(如蛋白質或核酸)上的酪氨酸殘基共價結合,實現局部高密度標記。生物素基團可與鏈霉親和素-熒光素、鏈霉親和素-HRP等探針結合,實現多重信號放大和多模態檢測。

  2. 提高檢測靈敏度:通過HRP催化酪酰胺自由基生成,實現抗原位點的高密度標記,結合鏈霉親和素-熒光素或酶探針,顯著提高低豐度蛋白檢測的靈敏度和準確性。

  3. 降低抗體濃度:在無需較高靈敏度的場景中,可降低抗體或探針濃度,減少非特異性結合和交叉反應。

  4. 膜不可滲透性:長鏈親水結構使其無法進入細胞,僅標記細胞表面蛋白,避免胞內蛋白干擾,適用于細胞表面受體研究。

三、應用領域

  1. 免疫組織化學(IHC):用于檢測低豐度抗原,通過生物素-XX酪酰胺的級聯放大,提高檢測靈敏度。

  2. 熒光原位雜交(FISH):結合熒光標記的鏈霉親和素,增強核酸信號,實現基因表達的定量和定位分析,尤其適用于熒光檢測中克服組織自發熒光背景干擾。

  3. 蛋白質印跡(Western Blot):提高低表達蛋白的檢測靈敏度。

  4. 基因表達分析:標記靶核酸分子,實現基因表達的定量和定位分析。

  5. 細胞成像實驗:通過標記細胞內的特定分子,使得研究人員能夠更直觀地觀察和研究細胞內的生物學過程。

四、操作注意事項

  1. 存儲條件:建議存放于-20℃以下環境,保持冰凍、干燥,并避光保存。短期保存可置于4℃。

  2. 溶解與使用:本產品溶于部分有機溶劑,使用過程中務必保持產品干燥,避免陽光直射。避免頻繁解凍,建議現配現用,確保產品性能穩定。

  3. 安全防護:操作時佩戴手套和防護眼鏡,避免長期吸入、皮膚接觸或攝入;在通風良好環境中使用。

  4. 緩沖液選擇:使用pH 7–9的緩沖液,避免pH影響靶分子結構或試劑穩定性。

  5. 多重標記:可與熒光標記試劑、酶標記試劑等聯合使用,實現多重標記和檢測,需根據實驗需求優化條件。

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